Obniżona aktywność urokinaza oskrzelowo-pęcherzykowego u pacjentów z zespołem zaburzeń oddechowych dorosłych ad 7

Wartość R2 dla regresji liniowej tej funkcji wynosiła 0,992 (P <0,01). Obecność nieaktywnej urokinazy w płynie po płukaniu u pacjentów z ARDS sugerowała, że płyn ten zawierał inhibitory urokinazy lub aktywności plazminy lub oba. Wyższe średnie całkowite stężenie białka w próbkach po płukaniu od pacjentów z ARDS w porównaniu z normalnymi osobnikami (1,46 . 1,17 mg na mililitr i 0,12 . 0,08 mg na mililitr, odpowiednio, P = 0,002) jest zgodne z zakłóceniem integralność komórek włośniczkowych i wyściółki pęcherzykowej, które występują w ARDS, umożliwiając dostęp antiplasmin z osocza do dróg oddechowych i pęcherzyków płucnych. To zakłócenie zostało potwierdzone przez testy płytek fibryny, w których plazminę dodano bezpośrednio do płynu do płukania. Funkcjonalną aktywność antiplasminy można było wykazać w próbkach płynu płuczącego od wszystkich ośmiu pacjentów z ARDS; jak pokazano na Figurze 4, aktywność ta była bezpośrednio skorelowana (P <0,001) z całkowitymi stężeniami białka w próbkach płynu płuczącego oskrzelowo-pęcherzykowego. Charakter tych antypasminów nie został szczegółowo zbadany, ale prawie na pewno wynikał częściowo z alfa2-antiplasmin. W sposób zgodny z właściwościami fizycznymi alfa2-antyplazminy, to hamowanie częściowo usuwano przez poprzednie traktowanie kwasem próbek popłuczyn (dane nie przedstawione).
Figura 5. Figura 5. Wykazanie kompleksów inhibitorów Urokinaza-aktywator plazminogenu w płynie z płukania oskrzelowo-pęcherzykowego u pacjentów z ARDS w teście podskórnym Fibrin Gel. W panelu A ml płynu płuczącego oskrzelowo-pęcherzykowego od każdego z ośmiu pacjentów z ARDS zatężono do 50 .l i poddano elektroforezie w warunkach denaturujących. Żele układano na agarozowych żelach zawierających fibrynę i plazminogen, a kanapkę inkubowano w 37 ° C przez 24 do 48 godzin. Przedstawiono reprezentatywne wyniki od dwóch normalnych osobników (ścieżki i 5) i trzech pacjentów z ARDS (ścieżki 2 do 4). Strefy lizy fibryny pojawiają się jako ciemne pasma, ponieważ są fotografowane z pośrednim oświetleniem. Ścieżka 6 pokazuje strefę lizy (55 kD) uzyskaną z oczyszczonej urokinazy. W panelu B ml płynu po płukaniu od każdego z trzech pacjentów z ARDS adsorbowano przeciwciałami IgG przeciwko PAI-1, PAI-2 lub fibronektynie jako kontrolę (C). Zaadsorbowane białko poddano następnie elektroforezie w żelu z dodecylosiarczanem sodu i testowano pod kątem aktywności urokinazy za pomocą testu na podkładzie z żelem fibrynowym.
Aby dodatkowo zbadać możliwość, że płyn z płukania oskrzelowo-pęcherzykowego u pacjentów z ARDS zawierał inhibitory urokinazy, zastosowaliśmy technikę gelunderlay fibryny. Technika ta została użyta przez wielu badaczy do wykrywania utajonej aktywności urokinaz, poprzez dysocjację urokinazy z odwracalnie związanego inhibitora lub przez denaturację kowalencyjnie związanego inhibitora w celu umożliwienia ekspresji związanego urokinazy. 18 19 20 21 Elektroforeza została użyta w ekwiwalencie ilość płynu z płukania od ośmiu zdrowych osób i siedmiu pacjentów z ARDS
[patrz też: izba aptekarska koszalin, bekpolmasz, gulka na szyi ]